摘要：氨检验方法

一、靛酚蓝分光光度法

1  原理

    空气中氨吸收在稀硫酸中，在亚硝基铁氰化钠及次氯酸钠存在下，与水杨酸生成蓝绿色的靛酚蓝染料，根据着色深浅，比色定量。

2  试剂和材料

    本法所用的试剂均为分析纯，水为无氨蒸馏水，制备方法见附录A。

    2.1  吸收液[c(H2SO4)=0.005mol/L]:量取2.8ml浓硫酸加入水中，并稀释至1L。临用时再稀释10倍。

    2.2  水杨酸溶液(50g/L)：称取10.0g水杨酸[C6H4(OH)COOH]和10.0g柠檬酸钠（Na3C6O7?2H2O），加水约50ml，再加55ml氢氧化钠溶液[c(NaOH)=2mol/L]，用水稀释至200ml。此试剂稍有黄色，室温下可稳定一个月。

    2.3  亚硝基铁氰化钠溶液（10g/L）：称取1.0g亚硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5?NO?2H2O]，溶于100ml水中，贮于冰箱中可稳定一个月。

    2.4  次氯酸钠溶液[c(CaClO)=0.05mol/L]：取1ml次氯酸钠试剂原液，用碘量法标准定其浓度（标定方法见附录B）。然后用氢氧化钠溶液[c(NaOH)=2mol/L]称释成0.05mol/L的溶液。贮于冰箱中可保存两个月。

    2.5  氨标准溶液 

           2.5.1  标准贮备液：称取0.3142g经105℃干燥1h的氯化铵（NH4Cl），用少量水溶解，移入100ml容量瓶中，用吸收液（见2.1）稀释至刻度，此液1.00ml含1.00mg氨。

           2.5.2  标准工作液：临用时，将标准贮备液（见2.5.1）用吸收液稀释成1.00ml含1.00μg氨。

3  仪器、设备

    3.1  大型气泡吸收管：有10ml刻度线，出气口内径为1mm，与管底距离应为3～5mm。

    3.2  空气采样器：流量范围0～2L/min，流量稳定。使用前后，用皂膜流量计校准采样系统的流量，误差应小于±5%。

    3.3  具塞比色管：10ml。

    3.4  分光光度计：可测波长为697.5nm，狭缝小于20nm。

4  采样

    用一个内装10ml吸收液的大型气泡吸收管，以0.5L/min流量，采气5L，及时记录采样点的温度及大气压力。采样后，样品在室温下保存，于24h内分析。

5  分析步骤

    5.1 标准曲线的绘制

           取10ml具塞比色管7支，按表1制备标准系列管。

表1氨标准系列

           在各管中加入0.50ml水杨酸溶液(见2.2)，再加入0.10ml亚硝基铁氰化钠溶液（2.3）和0.10ml次氯酸钠溶液（见2.4），混匀，室温下放置1h。用1cm比色皿，于波长697.5nm处，以水作参比，测定各管溶液的吸光度。以氨含量（μg）作横座标，吸光度为纵座标，绘制标准曲线，并用最小二乘法计算校准曲线的斜率、截距及回归方程（1）。 

                 Y=bX+a      ……………………………………………………（1） 

           式中：Y??标准溶液的吸光度； 

                       X??氨含量，μg； 

                       a??回归方程式的截距； 

                       b??回归方程式斜率，吸光度/μg。

标准曲线斜率b应为0.081±0.003吸光度/μg氨。以斜率的倒数作为样品测定时的计算因子（Bs）。

    5.2  样品测定

            将样品溶液转入具塞比色管中，用少量的水洗吸收管，合并，使总体积为10ml。再按制备标准曲线的操作步骤（5.1）测定样品的吸光度。在每批样品测定的同时，用10ml未采样的吸收液作试剂空白测定。如果样品溶液吸光度超过标准曲线范围，则可用试剂空白稀释样品显色液后再分析。计算样品浓度时，要考虑样品溶液的稀释倍数。

6  结果计算

    6.1  将采样体积按公式（2）换算成标准状态下的采样体积； 

                 V0=Vt×T0/(273+t)×P/P0      ……………………………………（2） 

           式中：V0??标准状态下的采样体积，L； 

                       Vt??采样体积，由采样流量乘以采样时间而得，L； 

                       T0??标准状态下的绝对温度，273K； 

                       P0??标准状态下的大气压力，101.3kPa； 

                       P??采样时的大气压力，kPa； 

                       t??采样时的空气温度，℃。

    6.2  空气中氨浓度按公式（3）计算： 

                 c(NH3)=(A-A0)Bs/V0      …………………………………………（3） 

           式中：c??空气中氨浓度，mg/m3； 

                       A??样品溶液的吸光度； 

                       A0??空白溶液的吸光度； 

                       Bs??计算因子，μg/吸光度； 

                       V0??标准状态下的采样体积，L。

7  测定范围、精密度的准确度

    7.1  测定范围

            测定范围为10ml样品溶液中含0.5～10μg氨。按本法规定的条件采样10min，样品可测浓度范围为0.01～2mg/m3。

    7.2  灵敏度

            10ml吸收液中含有1μg的氨应有0.081±0.003吸光度。

    7.3  检测下限

            检测下限为0.5μg/10ml，若采样体积为5L时，最低检出浓度为0.01mg/m3。

    7.4  干扰和排除

           对已知的各种干扰物，本法已采取有效措施进行排除，常见的Ca2+、Mg2+、Fe3+、Mn2+、Al3+等多种阳离子已被柠檬酸络合；2μg以上的苯氨有干扰，H2S允许量为30μg。

    7.5  方法的精密度

            当样品中氨含量为1.0，5.0，10.0μg/10ml，其变异系数分别为3.1%，2.9%，1.0%，平均相对偏差为2.5%。

    7.6  方法的准确度

            样品溶液加入1.0，3.0，5.0，7.0μg/的氨时，其回收率为95～109%，平均回收率为100.0%。

附录A  无氨蒸馏水的制备 

              于普通蒸馏水中，加少量的高锰酸钾至浅紫色，再加少量氢氧化钠至呈碱性。蒸馏，取其中间蒸馏部分的水，加少量硫酸溶液呈微酸性，再蒸馏一次。

附录B 次氯酸钠溶液浓度的标定

            称取2g碘化钾（KI）于250ml碘量瓶中，加水50ml溶解，加1.00ml次氯酸钠（NaClO）试剂，再加0.5ml盐酸溶液[50%（V/V）]，摇匀，暗处放置3min。用硫代硫酸钠标准溶液[c(1/2NaS2O3)=0.100mol/L]。滴定析出的碘，至溶液呈黄色时，加1ml新配制的淀粉指示剂（5g/L），继续滴定至蓝色刚刚褪去，即为终点，记录所用硫代硫酸钠标准溶液体积，按公式（4）计算次氯酸钠溶液的浓度。 

               c(NaClO)=c(1/2NaS2O3)×V/1.00×2        ……………………（4） 

           式中：c(NaClO)??次氯酸钠试剂的浓度，mol/L； 

                       c(1/2NaS2O3)??硫代硫酸钠标准溶液浓度，mol/L； 

                        V??硫代硫酸钠标准溶液用量，ml。

二、纳氏试剂分光光度法

1  原理

    空气中氨吸收在稀硫酸中，与纳氏试剂作用生成黄色化合物，根据着色深浅，比色定量。

2  试剂和材料

    本法所用的试剂均为分析纯，水为无氨蒸馏水。制备方法见附录A。

    2.1  吸收液[C(H2SO4=0.005mol/L)]：量取2.8ml浓硫酸加入水中，并稀释至1L。临用时再稀释10倍。

    2.2  酒石酸钾钠溶液（500g/L）：称取50g酒石酸钾钠（KNaC4H4O6?4H2O）溶于100ml水中，煮沸，使约减少20ml为止，冷却后，再用水稀释至100ml。

    2.3  纳氏试剂：称取17g二氯化汞（HgCl2）溶解300ml水中，另称取35g碘化钾（KI）溶解在100ml水中，然后将二氯化汞溶液缓慢加入到碘化钾溶液中，直至形成红色沉淀不溶为止。再加入600ml氢氧化钠溶液（200g/L）及剩余的二氯化汞溶液。将此溶液静置1～2天，使红色混浊物下沉，将上清液移入棕色瓶中，（或用5#玻璃砂芯漏斗过滤），用橡皮塞塞紧保存备用。此试剂几乎无色。（纳氏试剂毒性较大，取用时必须十分小心，接触到皮肤时，应立即用水冲洗；含纳氏试剂的废液，应集中处理，处理方法见附录B）。

    2.4  氨标准溶液

            2.4.1  标准贮备液：称取0.3142g经105℃干燥1h的氯化铵（NH4Cl），用少量水溶解，移入100ml容量瓶中，用吸收液（见2.1）稀释至刻度。此溶液1.00ml含1.00μg氨。

            2.4.2  标准工作液：临用时，将标准贮备液（见2.4.1）用吸收液稀释成1.00ml含2.00μg氨。

3  仪器设备

    3.1  大型气泡吸收管：有10ml刻度线。

    3.2  空气采样器：流量范围0～2L/min，流量稳定。使用前后，用皂膜流量计校准采样系统的流量，误差应小于±5%。

    3.3  具塞比色管：10ml。 

    3.4  分光光度计：可测波长为45nm，狭缝小于20nm。

4  采样

    用一个内装10ml吸收液的大型气泡吸收管，以0.5L/min流量，采气5L，及时记录采样点的温度及大气压力。采样后，样品在室温下保存，于24h内分析。

5  分析步骤

    5.1 标准曲线的绘制

           取10ml具塞比色管7支，按表1制备标准系列管。

表1    氨标准系列

          在各管中加入0.1ml酒石酸钾钠溶液，再加入0.5ml纳氏试剂，混匀，室温下放置10min。用1cm比色皿，于波长425nm处，以水作参比，测定吸光度。以氨含量（μg）作横座标，吸光度为纵座标，绘制标准曲线，并用最小二乘法计算标准曲线的斜率、截距及回归方程（1）。 

                 Y=bX+a      …………………………………………（1） 

           式中：Y??标准溶液的吸光度； 

                       X??氨含量，μg； 

                       a??回归方程式的截距； 

                       b??回归方程式斜率，吸光度/μg。 

           标准曲线斜率b应为0.014±0.002吸光度/μg氨。以斜率的倒数作为样品测定时的计算因子（Bs）。

    5.2  样品测定

           将样品溶液转入具塞比色管中，用少量的水洗吸收管，合并，使总体积为10ml。再按制备校准曲线的操作步骤测定样品的吸光度。在每批样品测定的同时，用10ml未采样的吸收液作试剂空白测定。如果样品溶液吸光度超过标准曲线范围，则可用试剂空白稀释样品显色液后再分析。计算样品浓度时，要考虑样品溶液的稀释倍数。

6  结果计算

    6.1 将采样体积按公式（2）换算成标准状态下的采样体积： 

           V0=Vt×T0/（273+t）×P/P0………………………………（2） 

           式中：V0??标准状态下的采样体积，L； 

                       Vt ??采样体积，由采样流量乘以采样时间而得，L； 

                       T0??标准状态下的绝对温度，273K； 

                       P0??标准状态下的大气压力，101.3kPa； 

                       P  ??采样时的大气压力，kPa； 

                       t    ??采样时的空气温度，℃。

    6.2  空气中氨浓度按公式（3）计算： 

                 c(NH3)=(A-A0)Bs/V0      ……………………………………（3） 

           式中：c  ??空气中氨浓度，mg/m3；

                       A  ??样品溶液的吸光度； 

                       A0??空白溶液的吸光度； 

                      Bs ??计算因子，μg/吸光度； 

                      V0 ??标准状态下的采样体积，L。

7  测定范围、精密度和准确度

    7.1  测定范围

           测定范围为10ml样品溶液中含2～20μg氨。按本法规定的条件采样10min，样品可测浓度范围为0.4～4mg/m3。

    7.2  灵敏度

           10ml吸收液中含有2μg的氨应有0.027±0.002吸光度。

    7.3  检测下限

            检则下限为2μg/10ml，若采样体积为5L时，最低检出浓度为0.4mg/m3。

    7.4  干扰和排除

            对已知的各种干扰物，本法已采取有效措施进行排除，常见的Ca2+、Mg2+、Fe3+、Mn2+、Al3+等多种离子低于10μg不干扰。H2S的允许量为5μg，甲醛为2μg，丙酮和芳香胺也有干扰，但样品中少见。

    7.5  方法的精密度

           当样品中氨含量为6.5，10.0，15.0μg时，其变异系数分别为8.4%，5.9%，3.9%，平均相对偏差为6.3%。

    7.6  方法的准确度

            样品溶液加入2.0，5.0，10.0μg的氨时，其回收率为95.2～111.8%,平均回收率为101.8%。

附录A  无氨蒸馏水的制备

             于普通蒸馏水中，加少量的高锰酸钾至浅紫红色，再加少量氢氧化钠至呈碱性。蒸馏，取其中间蒸馏部分的水，加少量硫酸溶液呈微酸性，再蒸馏一次。

附录B 含汞废液的处理方法

             为了避免含汞废液造成对环境的污染，应将废液中的汞进行处理。方法是：将废液收集在塑料桶中，当废水容量达到20L左右时，以曝气方式混匀废液，同时加入50ml氢氧化钠（400g/L）溶液，再加入50g硫化钠（Na2S?9H2O），10min后，慢慢加入200ml市售过氧化氢，静置24h后，抽取上清液弃去。